Ilga peptīdu sintēze (līdz 189 aminoskābēm)

Garā peptīdu sintēze|Garās ķēdes peptīdu pielāgošana|Sarežģīta peptīdu sintēze|Peptīdi virs 50 mer|Zinātne-Peptīds

Nepieciešams garš peptīds ar vairāk nekā 50 aminoskābēm? Zinātne-Peptīdu garās peptīdu sintēzes pakalpojums aptver 50–189 aminoskābes, izmantojot segmentētu sintēzes stratēģiju, pārvarot hidrofobās agregācijas un zemas sintēzes efektivitātes problēmas, uc. 20 gadu pieredze un stabila piegāde. Laipni lūdzam sazināties ar mums.

Kāpēc garus peptīdus ir grūti izgatavot?
Ikviens, kurš ir veicis peptīdu sintēzi, zina, ka problēma rodas, ja peptīdu ķēde ir gara: lielākā daļa uzņēmumu to var izdarīt 20 aminoskābju robežās. Kad runa ir par vairāk nekā 40 aminoskābēm, mēs sākam izvēlēties secību. Ja ir 60 vai vairāk aminoskābju, uzņēmumu skaits, kas var pārņemt, tiek samazināts uz pusi. Runājot par vairāk nekā 100 aminoskābēm, nav daudz uzņēmumu, kas uzdrošinās to darīt.

 

Kāpēc? Tā kā garā peptīdu sintēze saskaras ar vairākiem kļūmēm:

Sintēzes efektivitāte samazinās: katrs aminoskābes paplašinājums, iznākums tiks diskontēts vienu reizi. 30 aminoskābes peptīds, katrs solis 99% iznākums, gala iznākums joprojām ir 74%; 60 aminoskābes, katrs solis joprojām ir 99%, gala iznākums ir tikai 55%. Faktiski daudzu soļu ienesīgums nevar sasniegt 99%.
Hidrofobā agregācija: ja garā peptīdā ir daudz hidrofobu aminoskābju, peptīdu ķēde sāk "saķerties" uz sveķiem, un aiz tā esošās aminoskābes nevar iekļūt.

Grūtības attīrīšanā: garo peptīdu un piemaisījumu aiztures laiks ir pārāk tuvu viens otram, lai iegūtu tīru griezumu.
Slikta šķīdība: Kad peptīds ir iegūts, to nevar izšķīdināt, tāpēc eksperimentu nevar veikt.
Mēs jau esam bijuši šajās bedrēs un zinām, kā tās apiet.

1. Garums: 50-189 aminoskābes

2. Segmentētās sintēzes stratēģija
Visefektīvākais veids, kā tikt galā ar gariem peptīdiem, ir tos segmentēt:
Segmentu atlase: sagrieziet garo peptīdu 2-4 segmentos pa 30-60 aminoskābēm katrā. Griešanas vietai jāatrodas vietā, kur sintēzes grūtības ir zemas, piemēram, izvairoties no nepārtrauktas hidrofobās zonas.
Fragmentu sintēze: katrs fragments tiek sintezēts un attīrīts atsevišķi līdz pietiekami augstai tīrības pakāpei.
Fragmentu savienošana: fragmentu savienošana kopā šķīdumā vai uz sveķiem. Savienošanas metode var būt gan dabiska ķīmiska, gan fermentatīva.
Salocīšana: ja peptīdam ir disulfīda saite, pēc savienošanas tas ir jāsaloka pareizā konformācijā.

3. Tīrība: atkarībā no eksperimentālajām prasībām

Katram garajam peptīdam ir pievienots HPLC un MS ziņojums, padarot tīrības datus caurspīdīgus.

4. Modifikācijas: garie peptīdi var arī pievienot funkciju
Fluorescējošais marķējums: FITC, TAMRA, vēlas redzēt, kur darbojas garais peptīds.
Biotīns: novelciet{0}}uz leju vai pārbaudiet.
Izotopu marķēšana: KMR vai masas spektrometrijas kvantitatīvai noteikšanai.
Fosforilēšana/glikozilēšana: pēc{0}}translācijas modifikāciju atdarināšana.

1. Mēs to darām 20 gadus
Ilgu peptīdu sintēzi nevar veikt ikviens. Gadu gaitā mēs esam strādājuši ar daudziem gariem peptīdiem: transmembrānu proteīnu fragmentiem, vīrusu saplūšanas peptīdiem, amiloīdiem proteīniem, pretmikrobu peptīdiem utt. Mums ir laba ideja par to, kuras sekvences ir viegli apkopot un kādos apstākļos tās var saglabāt. Ja jūs nākat pie mums uz garo peptīdu sintēzi, jums vismaz nav jākāpj bedrē no sākuma.

2. Frakcionālā sintēze: ne tikai sagriešana gabalos
Segmentēšana izklausās vienkārši, taču svarīga ir vieta, kur izgriezt, cik garš ir katrs segments un kā tos savienot. Mums ir vairāki principi:
Griešana hidrofilajā zonā: izvairieties no griešanas hidrofobajā kodolā, pretējā gadījumā segmenti sakrājas paši.
Sabalansējiet fragmentu garumu: nepadariet vienu segmentu īpaši grūti izpildāmu un citus segmentus īpaši vienkāršus.. 3.
Savienojuma punkta izvēle: dabīgiem ķīmiskiem savienojumiem ir nepieciešams tioesteris C-terminālī un Cys N- terminālī, kas ir jāizstrādā iepriekš.

3. Hidrofobie peptīdi: īpaša šķīdinātāju sistēma.
Daži garie peptīdi ir tik hidrofobi, ka tos nevar atrisināt ar parastajiem šķīdinātājiem, tāpēc sintezējot tie tiks salipināti uz sveķiem. Mums ir īpaša šķīdinātāju sistēma un piedevas, lai saglabātu peptīdu ķēdes stiepšanos sintēzes procesā, lai varētu iekļūt sekojošās aminoskābes.

4. Kvalitātes kontrole: dati katrā solī
Garo peptīdu kvalitātes kontrole ir sarežģītāka nekā īso peptīdu kvalitātes kontrole:
Starpproduktu kvalitātes kontrole: pēc katra fragmenta sintezēšanas vispirms izmēra tīrību un molekulmasu un pēc tam pārejiet pie nākamās darbības pēc testa nokārtošanas.
Savienojuma procesa uzraudzība: izlasiet savienojuma reakciju un izmēra MS, lai redzētu savienojuma efektivitāti.
Galaprodukta pārbaude: HPLC tīrībai, MS molekulmasai, MS/MS secības pareizībai (pēc izvēles).
Šķīdības tests: Nodrošiniet ieteicamos šķīdinātājus un šķīdināšanas metodes, lai jūs nesaņemtu peptīdus, kas nešķīst.
Veicot garo peptīdu sintēzi, dati runā paši par sevi, un katrs solis ir izsekojams.

5. No miligramiem līdz simts miligramiem, līdz galam
Miligrami skrīninga fāzei, desmit miligrami apstiprināšanas fāzei, simts miligrami strukturālajam pētījumam - mēs to visu varam pieņemt. Tas pats projekts, tas pats līdzinieks, nav nepieciešams-atkārtoti saskaņot.

• Piegāde: Liofilizēts pulveris, centrifūgas mēģenes vai flakoni, aizsargāti ar slāpekli.
• Pavaddokumenti: COA (HPLC profils + MS profils), MS/MS (secības apstiprināšana pēc izvēles), sintēzes ziņojums (segmentēšanas un savienošanas process).
• Izvēles testi: peptīdu saturs, endotoksīns, mitrums, aminoskābju sastāvs, šķīdības tests.
• Pielāgots iepakojums: sadalīšana un marķēšana atbilstoši jūsu prasībām.
• Katrs Long Peptide Synthesis produkts pirms izsūtīšanas tiek divreiz{0}}pārbaudīts, lai pārliecinātos, ka secība ir pareiza un tīrība atbilst standartam.

Neatkarīgi no tā, vai vēlaties 80 aa transmembrānu peptīdu vai 150 aa vīrusa proteīnu, varat runāt ar mums. Ja lūdzat Science{3}}Peptīdu veikt garo peptīdu sintēzi, jums vismaz nav jāmēģina pa vienam.

Man vajag, lai tu man pateiktu:
Peptīdu secība (vai mērķa informācija)
Cik daudz (miligramos)
tīrības prasības
nav disulfīdu saišu vai citu modifikāciju

Kad jūs to vēlaties?

Sniegs jums priekšizpēti un piedāvājumu 24 stundu laikā.