Glikopeptīdu sintēze

Glikopeptīdu sintēze|Glikozilētie peptīdi|O-Saistītie glikopeptīdi|N-Saistītie glikopeptīdi|Zinātne-Peptīds

Vai nepieciešami glikopeptīdi glikobioloģijas pētījumiem vai glikoproteīnu atdarināšanai? Zinātnes-Peptīdu glikopeptīdu sintēzes pakalpojums aptver O-saikni, N-saikni un sarežģītu glikānu ieviešanu. 20 gadu pieredze, precīza glikozilācijas vietu kontrole. Lūdzu, sazinieties ar mums.

Kāpēc jūs lietojat glikopeptīdus?
Organismā olbaltumvielas reti ir “kaili” - lielākā daļa satur cukurus. Glikozilācija ietekmē olbaltumvielu locīšanu, stabilitāti, atpazīšanu un signalizāciju. Ja vēlaties pētīt glikoproteīna funkciju vai izstrādāt antivielu pret glikāna epitopu, nepietiek ar kailu peptīdu, jums ir jāpievieno glikāni.

 

Glikopeptīdu sintēzes grūtības slēpjas pašas glikāna ķēdes sarežģītajā struktūrā un vajadzībā nodrošināt pareizo vietu un glikāna ķēdes integritāti, kad tā ir pievienota peptīdam; O-konjugācija ir laba, taču N-konjugētās glikāna ķēdes ir daudz garākas, tādēļ sintēzes grūtības tieši dubultojas. Mēs jau iepriekš esam iekāpuši šajās bedrēs un zinām, kā tās apiet.

1. Glikozilēšanas veids: tiek izveidotas gan O-, gan N-saistes

Atkarībā no jūsu pētniecības mērķiem mēs noteiksim, kura glikozilācijas stratēģija ir vispiemērotākā. Pirmais solis glikopeptīdu sintēzē ir izvēlēties pareizo cukura ķēdi un savienojumu.

2. Cukura ķēdes garums: no monosaharīdiem līdz sarežģītām cukura ķēdēm
Monosaharīdu modifikācija: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal utt., visvienkāršākā un veiksmīgākā.
Disaharīdi/trisaharīdi: piemēram, laktoze, hitozāns, ir labi jāaizsargā ar glikozila donoriem.
Sarežģītas cukura ķēdes: augsta mannozes tipa, kompleksie N-glikāni, līdz deviņiem cukuriem.
Sialilēšana: terminālā saite ar sialskābi atdarina dabisko glikoproteīnu atpazīšanas vietu.

3. Punktu kontrole: precizitāte, bez minējumiem
Kādas ir lielākās bailes no glikozilācijas? Glikokonjugācija nepareizā vietā vai viena vieta ir savienota, bet otra nav. Izmantojot mūsu ortogonālās aizsardzības stratēģiju, mēs varam ieviest glikozilāciju noteiktā vietā un atstāt pārējās vietas neskartas. Vai nepieciešams glikozilēt vairākas vietas? Mēs varam tos iepazīstināt pa vienam un skaidri kontrolēt.

4. Tīrība: atkarībā no eksperimentālajām prasībām

Katram glikopeptīdam ir pievienoti HPLC un MS ziņojumi ar datiem, kas apstiprina glikāna ķēdes integritāti un pareizo vietu.

5. Citas glikopeptīdu modifikācijas
Glikopeptīdi paši par sevi ir pietiekami sarežģīti, taču dažiem eksperimentiem ir nepieciešams kaut kas cits:
Fluorescējošais marķējums: FITC, TAMRA, glikopeptīda galamērķa izsekošana.
Biotīns: novelciet{0}}uz leju vai pārbaudiet.
Fosforilēšana: vienlaicīga glikozilācijas un fosforilācijas simulācija, lai pētītu šķērsrunu.
Izotopu marķēšana: KMR vai masas spektrometrijas kvantitatīvai noteikšanai.

1. Glikoķīmija + peptīdu sintēze, divvirzienu pieeja
Glikopeptīdu sintēze ir sarežģīta, jo tā šķērso divus - glikoķīmijas un peptīdu sintēzes laukus. Tie, kas ražo cukuru, var nezināt peptīdu, un tie, kas ražo peptīdu, var nezināt cukuru. Mums ir cilvēki abās pusēs, paši sagatavojam glikozildonoru, paši optimizējam glikozilācijas apstākļus, nevajag ārpakalpojumus, un problēmas varam noregulēt paši.

2. Elastīgas aizsardzības stratēģijas un cukura ķēdes integritāte
Glikozilēšanas laikā ir jāaizsargā pati cukura ķēde, pretējā gadījumā reakcijas apstākļi izsitīs cukuru. Mums ir dažādas aizsarggrupu kombinācijas, kas var stabilizēt cukura ķēdi peptīdu sintēzes apstākļos un pēc tam atstāt cukuru neskartu, kad tas tiek noņemts pēdējā posmā.

3. Vietnes kontrole: pievienojieties, kur vien vēlaties
Glikozilēšana vienā vietā: cukuru ievada noteiktā vietā un atstāj kailu citur.
Vairāku -vietņu glikozilēšana: dažādās vietās var būt dažādas cukura ķēdes, kuras var ievadīt pa vienai, netraucējot viena otrai.
Selektīva glikozilācija: ir vairāki Ser/Thr, tikai viens no tiem ir glikozilēts -, kas panākts ar saglabāšanas stratēģiju, nevis pēc varbūtības.

4. QC: vai cukura ķēde ir neskarta? Vai vietnes ir pareizas?
Glikopeptīdi kvalitātes kontrolei ir apgrūtinošāki nekā parastie peptīdi:

MS molekulmasa: jūs varat noteikt, vai cukurs ir vai nav pievienots, skatoties uz to.
MS/MS, lai redzētu vietni (neobligāti): sadaliet peptīdu, lai redzētu, kurai aminoskābei cukurs ir pievienots.
HPLC, lai redzētu tīrību: meklējiet arī atcukurošanas piemaisījumus.
Cukura sastāva analīze: Cukura ķēdes sastāva un savienojumu mērīšana, ja nepieciešams.
Dati par katru glikopeptīdu tiek sniegti jums, tāpēc jums nav jāmin.

5. No miligramiem līdz simts miligramiem, līdz galam
Miligrami skrīninga fāzei, desmit miligrami apstiprināšanas fāzei, simts miligrami strukturālajam pētījumam - mēs to visu varam pieņemt. Tas pats projekts, tas pats līdzinieks, nav nepieciešams-atkārtoti saskaņot.

Strukturālā bioloģija KMR/glikoproteīna homogēno cukura ķēžu kristāliskā struktūra, izotopu marķēšana

• Piegāde: Liofilizēts pulveris, centrifūgas mēģenes vai flakoni, aizsargāti ar slāpekli.
• Pavaddokumenti: COA (HPLC profils + MS profils), MS/MS (glikozilācijas vietu apstiprinājums).
• Izvēles testi: peptīdu saturs, endotoksīns, mitrums, cukura sastāva analīze.
• Pielāgots iepakojums: sadalīšana un marķēšana atbilstoši jūsu prasībām.
• Katrs glikopeptīdu sintēzes produkts pirms izsūtīšanas tiek{0}}kārtīgi pārbaudīts, lai pārliecinātos, ka cukura ķēde ir pilnīga un vietas ir pareizas.

Neatkarīgi no tā, vai vēlaties vienkāršus glikopeptīdus, kas modificēti ar monosaharīdiem, vai sarežģītus ar N-saistītus glikānus, mēs varam runāt. Vismaz jums nav jāmeklē kāds no abām pusēm, ja lūdzat Science-peptīdu veikt glikopeptīdu sintēzi.

Man vajag, lai tu man pateiktu:
peptīdu sekvences
Glikozilācijas vietas un cukura ķēdes struktūras (labākās ir atsauces)
Cik daudz (miligramos)
tīrības prasības

Kad tu to vēlies?
Sniegt jums priekšizpēti un piedāvājumu 24 stundu laikā.